Automated quantitative restoration of brigth field microscopy images

La presente invención divulga y reclama un método cuantitativo de restauración de imágenes en campo claro (QRBF por sus siglas en inglés) que recupera fielmente la forma y permite cuantificar el tamaño de muestras individuales no teñidas. El método QRBF restaura imágenes de campo claro fuera de foco de muestras no teñidas mediante la aplicación de deconvolución, la cual mejora el contraste y permite un análisis cuantitativo. Para realizar la deconvolución, nuestro procedimiento utiliza una función de dispersión de punto (PSF por sus siglas en inglés) modelada a partir de la teoría. La deconvulución de la imagen se puede realizar incluso desde una única imagen de entrada en dos dimensiones (“2D-QRBF por sus siglas en inglés), e información cuantitativa como el tamaño y forma de las muestras puede ser determinada a partir de las imágenes restauradas por 2D-QRBF. La aplicación de 2D-QRBF en un proceso de muestreo de alto rendimiento para evaluar los cambios de forma de las células durante choque hiperosmóticos muestra que el enfoque de restauración digital descrito es adecuado para el análisis cuantitativo de imágenes de campo claro no teñidas en un proceso de citometría de imágenes de alto rendimiento.